Home · Kennisbank · Reconstitueren met BAC water
Reconstitutie

Reconstitueren met BAC water, stap voor stap

Gevriesdroogde peptiden moeten voor gebruik worden opgelost. Dat proces heet reconstitutie. Hoe je dat doet bepaalt de concentratie van je oplossing, en daarmee hoe nauwkeurig je kunt doseren. Deze uitleg behandelt de verhoudingen, de werkwijze en het bewaren.

8 minuten lezen Uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

Wat is reconstitutie

Peptiden worden geleverd als gevriesdroogd poeder. Dat is de vorm waarin ze het langst stabiel blijven: zonder water verlopen afbraakreacties vrijwel niet. Voor gebruik in onderzoek moet dat poeder weer in oplossing worden gebracht, en dat proces heet reconstitutie.

Bij reconstitutie voeg je een afgemeten hoeveelheid vloeistof toe aan de vial. Het poeder lost daarin op en vormt een heldere oplossing. Hoeveel vloeistof je toevoegt bepaalt de concentratie: dezelfde hoeveelheid peptide in minder water levert een geconcentreerdere oplossing op.

Belangrijk om te weten: de hoeveelheid peptide in de vial verandert niet door reconstitutie. Je verdunt alleen. Vijf milligram peptide blijft vijf milligram, of je er nu één of drie milliliter aan toevoegt.

Waarom BAC water

BAC staat voor bacteriostatisch. Het is steriel water waaraan 0,9 procent benzylalcohol is toegevoegd. Die benzylalcohol remt de groei van bacteriën, waardoor een oplossing langer houdbaar blijft dan met gewoon steriel water.

Het verschil met de alternatieven:

VloeistofHoudbaarheid na oplossen
Bacteriostatisch waterEnkele weken, gekoeld
Steriel waterKort, meestal enkele dagen
ZoutoplossingKort, geen conservering

Voor onderzoek waarbij een vial over meerdere sessies wordt gebruikt is bacteriostatisch water daarom de gebruikelijke keuze. Wordt een vial in één keer verbruikt, dan is dat onderscheid minder relevant.

Wat je nodig hebt

  • De vial met gevriesdroogd peptide
  • Bacteriostatisch water
  • Een steriele spuit met naald voor het overbrengen
  • Alcoholdoekjes voor het reinigen van de rubberen doppen
  • Een schone, opgeruimde werkplek

Let op: onze peptide-pennen zijn voorgevuld en hoeven niet gereconstitueerd te worden. Deze uitleg gaat over vials met gevriesdroogd poeder.

De berekening

De concentratie van je oplossing volgt uit een eenvoudige deling: de hoeveelheid peptide gedeeld door de hoeveelheid vloeistof.

Een voorbeeld met een vial van 5 mg:

Toegevoegd waterConcentratiePer 0,1 ml
1 ml5 mg/ml500 mcg
2 ml2,5 mg/ml250 mcg
3 ml1,67 mg/ml167 mcg
5 ml1 mg/ml100 mcg

Welke verhouding het handigst is, hangt af van de hoeveelheden waarmee je werkt. Een lagere concentratie betekent dat je grotere volumes afmeet, wat nauwkeuriger af te lezen is op de schaalverdeling van een spuit. Een hogere concentratie betekent kleinere volumes, wat praktisch is als je met beperkte hoeveelheden werkt.

Vuistregel: kies een verhouding waarbij de hoeveelheid die je afmeet goed afleesbaar is op je spuit. Volumes onder de 0,05 ml zijn lastig nauwkeurig af te meten.

Stap voor stap

De werkwijze in zeven stappen:

  1. Laat beide vials op kamertemperatuur komen. Koud glas en koude vloeistof geven meer kans op condens en maken oplossen trager.
  2. Reinig de rubberen doppen van beide vials met een alcoholdoekje en laat ze drogen.
  3. Trek de berekende hoeveelheid BAC water op in de spuit.
  4. Steek de naald schuin door de dop van de peptidevial en richt de straal tegen de glaswand, niet rechtstreeks op het poeder.
  5. Laat de vloeistof langzaam langs de wand lopen. Duw niet met kracht; een peptide is een kwetsbaar molecuul en te veel kracht kan de structuur beschadigen.
  6. Laat de vial rustig staan tot het poeder is opgelost. Dat duurt meestal enkele minuten. Niet schudden.
  7. Controleer of de oplossing helder is voordat je hem gebruikt.

Niet schudden. Dit is de meest gemaakte fout. Schudden veroorzaakt schuim en mechanische belasting, wat de peptidestructuur kan aantasten. Rustig kantelen of laten staan werkt beter.

Bewaren na oplossen

Zodra een peptide is opgelost, begint de houdbaarheid te lopen. Bewaar de vial gekoeld tussen 2 en 8 graden, in het donker.

  • Niet invriezen na reconstitutie. IJskristallen kunnen de peptidestructuur beschadigen.
  • Bescherm tegen licht. Sommige peptiden zijn lichtgevoelig.
  • Vermijd temperatuurwisselingen. Haal de vial uit de koeling voor gebruik en zet hem daarna direct terug.
  • Noteer de datum van reconstitutie op de vial, zodat je weet hoe lang de oplossing er staat.

Meer over bewaren staat in ons artikel over peptiden bewaren.

Veelgemaakte fouten

Rechtstreeks op het poeder spuiten

De straal met kracht op het poeder richten geeft mechanische belasting. Richt tegen de glaswand, zodat de vloeistof rustig naar beneden loopt.

Schudden om het sneller op te lossen

Geduld werkt beter. De meeste peptiden lossen binnen enkele minuten vanzelf op.

De verhouding niet noteren

Als je later niet meer weet hoeveel water je hebt toegevoegd, weet je ook de concentratie niet meer. Noteer het op de vial of in je logboek.

Een troebele oplossing toch gebruiken

Blijft een oplossing na een half uur troebel, of drijven er deeltjes in, gebruik hem dan niet. Neem in dat geval contact op, dan kijken we mee.

Veelgestelde vragen

Over reconstitueren

Hoeveel BAC water moet ik toevoegen?
Dat bepaal je zelf, aan de hand van de concentratie waarmee je wilt werken. Een vial van 5 mg met 2 ml water geeft 2,5 mg per milliliter. Kies een verhouding waarbij de hoeveelheid die je afmeet goed afleesbaar is op je spuit.
Mag ik gewoon steriel water gebruiken?
Dat kan, maar de oplossing is dan korter houdbaar omdat er geen bacterieremmende stof in zit. Voor een vial die in één keer wordt gebruikt maakt het weinig uit. Wordt een vial over meerdere sessies gebruikt, dan is bacteriostatisch water de gebruikelijke keuze.
Waarom lijkt mijn vial leeg?
Omdat wij geen vulstoffen gebruiken. Bij hoeveelheden van 5 of 10 mg is gevriesdroogd poeder met het blote oog nauwelijks te zien. De volledige hoeveelheid is wel aanwezig, alleen zonder de vulstoffen die het optisch groter maken.
Hoe lang blijft de oplossing goed?
Met bacteriostatisch water en gekoelde bewaring meestal enkele weken. De exacte houdbaarheid verschilt per compound. Noteer de datum van reconstitutie, en gebruik een oplossing niet meer als hij troebel wordt of er deeltjes in drijven.
Geldt dit ook voor de peptide-pennen?
Nee. Onze pennen zijn voorgevuld met een kant-en-klare oplossing. Er hoeft niets opgelost of afgewogen te worden. Deze uitleg gaat over vials met gevriesdroogd poeder.
Liever geen voorbereiding?

Bekijk onze peptide-pennen

Voorgevuld, kant-en-klaar en met een vaste dosis per klik. Geen reconstitutie, geen afwegen.